GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》已于近日实施。新版标准增加了实时荧光 PCR方法作为乳酸菌鉴定选做方法,同时修改了乳酸菌定义、样品制备和培养时间、嗜热链球菌和乳杆菌计数方法描述、MRS和MC培养基成分等关键内容。为确保标准的有效实施和准确应用,CICC对标准中涉及的乳酸菌特性进行验证并开发质控样品,以满足检测实验室的质量控制需求。
标准菌株/质控样品推荐列表
标准菌株典型特性
一、干酪乳酪杆菌 CICC 6117
MRS培养基,36℃±1℃,厌氧培养48 h,菌落为圆形、白色,凸起,表面光滑、湿润、边缘整齐。
参照标准采用干酪乳杆菌引物和探针序列,大肠埃希氏菌为阴性对照,无RNase水为空白对照,干酪乳酪杆菌CICC 6117出现典型扩增曲线,检测Ct≤35。
二、鼠李糖乳酪杆菌 CICC 6001
MRS培养基,36℃±1℃,厌氧培养48 h,菌落为圆形、白色,凸起,表面光滑、湿润、边缘整齐。
参照标准采用鼠李糖乳杆菌引物和探针序列,大肠埃希氏菌为阴性对照,无RNase水为空白对照,鼠李糖乳酪杆菌CICC 6001出现典型扩增曲线,检测Ct≤35。
三、德氏乳杆菌保加利亚亚种 CICC 6047
MRS培养基,36℃±1℃,厌氧培养48 h,菌落为圆形、白色,凸起,表面光滑、湿润、边缘整齐或粗糙。
参照标准采用德氏乳杆菌保加利亚亚种引物和探针序列,大肠埃希氏菌为阴性对照,无RNase水为空白对照,德氏乳杆菌保加利亚亚种CICC 6047出现典型扩增曲线,检测Ct≤35。
四、嗜酸乳杆菌 CICC 6074
MRS培养基,36℃±1℃,厌氧培养48 h,菌落较小,圆形、灰白色,微凸起,表面光滑、湿润、边缘整齐。
参照标准采用嗜酸乳杆菌引物和探针序列,大肠埃希氏菌为阴性对照,无RNase水为空白对照,嗜酸乳杆菌CICC 6074出现典型扩增曲线,检测Ct≤35。
五、罗伊氏粘液乳杆菌 CICC 6226
MRS培养基,36℃ ±1℃,厌氧培养48 h,菌落为圆形、白色,凸起,表面光滑、湿润、边缘整齐。
参照标准采用罗伊氏乳杆菌引物和探针序列,大肠埃希氏菌为阴性对照,无RNase水为空白对照,罗伊氏粘液乳杆菌CICC 6226出现典型扩增曲线,检测Ct≤35。
六、植物乳植物杆菌 CICC 6009
MRS培养基,36℃±1℃,厌氧培养48 h,菌落为圆形、白色,凸起,表面光滑、湿润、边缘整齐。
参照标准采用植物乳杆菌引物和探针序列,大肠埃希氏菌为阴性对照,无RNase水为空白对照,植物乳植物杆菌CICC 6009出现典型扩增曲线,检测Ct≤35。
七、嗜热链球菌 CICC 6063
MC培养基,36℃±1℃,好氧培养48 h,菌落为较小圆形、粉色至红色,凸起,表面光滑、湿润、边缘整齐。
参照标准采用嗜热链球菌引物和探针序列,大肠埃希氏菌为阴性对照,无RNase水为空白对照,嗜热链球菌CICC 6063出现典型扩增曲线,检测Ct≤35。
中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)多年来积极推动标准菌株研发与行业应用,开发出国内首套具有自主知识产权的食品安全标准菌株,涉及细菌、酵母和霉菌三大类。中心现有标准菌株261株,23株CICC标准菌株进入世界微生物数据中心(WDCM)推荐列表,2项产品获得国家有证标准样品证书,中心技术能力通过ISO 17034体系认可,达到国际领先水平。