起草单位：中国药品生物制品检定所

目    次

前言................................................................................... 3

引言................................................................................... 4

微生物菌种保藏库管理规程............................................................... 5

1 范围................................................................................. 5

2 规范性引用文件....................................................................... 5

3 术语和定义........................................................................... 5

4 菌种保藏库管理的基本原则............................................................. 5

5 菌种库的建设......................................................................... 5

6 菌种保藏库的日常管理................................................................. 6

参考文献............................................................................... 6

前    言

本规范由微生物菌种资源平台建设项目提出。

本规范起草单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、中国兽医药品监察所、中国科学院微生物所、中国林业科学研究院森林保护研究所、中国药品生物制品检定所、中国医学科学院医药生物技术研究所、中国食品发酵工业研究院。

本规范主要起草人：姜瑞波、顾金刚、周宇光、朴春根、叶强、张月琴、刘红宇、陈敏、程池等。

引    言

微生物菌种资源是自然科技资源的重要组成部分。

微生物菌种保藏库管理规程的制定是为了实现微生物菌种库管理的规范化以更有效地保护现有的普通微生物菌种资源；是规范整理、整合我国微生物菌种资源的基础，也是实现微生物菌种资源社会共享的需要。

本规程是依据现有工作基础和实际需要制定的，力求符合我国国情。本规程规定了菌种库管理的基本原则，菌种的出入库流程及菌种库的日常管理。适用于微生物菌种常温库、4℃菌种库、液氮库、低温库管理。

微生物菌种保藏库管理规程

1　范围

本规程规定了微生物菌种保藏库管理的基本原则，菌种的出入库流程及菌种库的日常管理。

2　规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB 19489  实验室生物安全通用要求

《病原微生物实验室生物安全管理条例》

《兽医实验室生物安全管理规范》

《中华人民共和国专利法》

《中国医学微生物菌种保藏管理办法》

3　术语和定义

3.1　菌种保藏库

菌种保藏库是设立于菌种保藏管理中心，用于长期保藏微生物资源，实现微生物资源社会共享的专业菌种库。菌种保藏库通常包括常温库、4℃菌种库、 液氮库、低温库。菌种保藏库还可以根据不同类型的微生物如细菌、真菌、病毒等下设不同子库，分别由具有相关专业背景的人员负责。

4　菌种保藏库管理的基本原则

菌种保藏库管理的基本原则是保证菌种库的安全即保证菌种资源的安全，尽可能保证菌种资源免于因人为或自然灾害等造成菌种的污染、流失或毁坏。同时还要保障操作者及其他人员的安全，并且应符合环境保护要求，不能对周围造成污染和危害。

5　菌种库的建设

根据保证菌种保藏库安全性的基本原则，菌种保藏库应尽可能建设在能够免于自然灾害的地点，根据实际情况设置防火设施。为了防止自然灾害或其他事故的发生，应建立异地复份库。菌种保藏库的建设应符合环境保护要求，不能对周围环境造成污染和危害。保藏机构所保藏菌种的生物危害程度应与其实验室生物防护水平相适应，实验室的装备和管理应符合GB 19489和《病原微生物实验室生物安全管理条例》的相关规定。

5.1　常温库

常温库的温度为常温。主要用于不宜冷冻干燥而适于石蜡油及斜面保藏等菌种的存放。应注意防潮、防霉、防虫、防火。

5.2　4℃菌种库

4℃菌种库温度一般控制在2-8℃。主要用于冷冻干燥管的存放。4℃菌种库的电路最好为双路控制或者有备用电源，以防备发生断电事故。菌种库最好设缓冲间，库内储存柜的材料应能防潮、防霉、防虫、防火。应每日记录温度一次，遇停电、机器损坏等特殊情况应及时报修并做记录。

5.3　低温库

一般采用-20℃及-80℃冰箱作为菌库，主要适于冷冻干燥管及冻存管的存放。低温库的电路最好为双路控制或者有备用电源，以防止断电事故发生。应注意库内通风，保证-20℃冰箱和-80℃冰箱的正常工作。如条件许可，应在库内加装空调以控制室内温度低于30℃。应每日记录温度一次，遇停电、机器损坏等特殊情况应及时报修并做记录。

5.4　液氮库

液氮库采用液氮罐保藏菌种，适用于绝大部分微生物的保藏。使用自动罐装液氮罐的菌种库的电路最好双路控制或者有备用电源。应注意通风。液氮库应定期补充液氮，并有专人每天监测作好记录。罐内温度及液氮容量测试可以采用下面两种方法：

1.对于自动罐装液氮罐,可以通过储存罐显示窗观察罐内温度、液面高度；并观察运输罐的压力表,根据实际情况补充液氮。

2.对于无液面显示液氮罐，应定期观察或多次记录罐装时间，确定合适的罐装周期。液氮罐液面高度的观察可以采用木长尺垂直插入罐底，取出长尺可以看到白色粉状界面，此界面即为罐内液面高度。长假期间也应有专人负责此项工作。

6　菌种保藏库的日常管理

6.1　菌种保藏库的日常管理规则

1.菌种保藏库应为双门双锁，钥匙应为双人负责管理。

2.谢绝非工作人员进入菌种保藏库，如有参观者等特殊情况需经负责人批准后方准进入。

3.责任人如出差、休假须将钥匙、资料移交指定的委托人。

4.谢绝与菌种无关物品入库。

5.禁止在菌种保藏库内饮食或吸烟。

6.应有专人负责菌种保藏库的维护。

6.2　菌种入库

菌种经纯度检测、复核及编号后应该放入相应的菌种保藏库中保存。入库时要进行入库登记，包括菌种编号、入库时间、入哪个菌种库、保护剂、保藏份数等。也可制作入库卡片。将该菌种的所有库藏信息录入菌种管理信息库。菌种保藏库工作人员因工作需要进入菌库须向责任人提前申请并填写入库时间、目的、取出或存放的菌种编号、数量等，并签名，入库时采取双人操作制。

6.3　菌种出库

菌种出库主要有两种情形：

—— 菌种发放给其他使用单位或个人，需要办理相关手续并填写表格；病原微生物需要根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《中国医学微生物菌种保藏管理办法》中的相关规定进行发放。

—— 菌种定期检测复核及转管。

菌种保藏库工作人员出库时应锁好库们并填写出库时间。

6.4　菌种定期检测复核及转管

入库后的菌种应进行定期检查复核及转管，发现有污染或退化迹象时，要及时分离纯化、复壮，每次检查要有详细记录。不同类别的菌种和不同保藏方法保藏的菌种的转管周期不同。转管时最好选用两种以上培养基观察培养特征，以备下次转管时参考。复核无误后准备下轮保藏工作。检测、复核、转管情况应填写相关表格并录入菌种信息管理库，记录出库菌种的保藏时间、保藏方式、保存复份数、转管时间，培养基、培养温度、培养时间、生长状况、纯度及复核结果，复壮培养基、复壮后保藏方法、复份保藏数量、冷干时状况等。

6.5　菌种信息管理

库藏菌种的所有信息应录入菌种库管理数据库。应建立菌株的纸质信息和数字化信息档案并备份。档案应安全存放，注意防潮、防霉、防虫、防火、防磁和防盗。注意菌种信息的及时更新，如菌种的更名、发表、新特征的发现等。

参考文献

[1] 微生物菌种保藏中心的建立和指南   WFCC标准委员会起草 WFCC执行理事会批准 世界菌种保藏联合会1990年11月颁发

[2] 国家自然科技资源平台 微生物菌种资源收集、整理、保存技术规程汇编（试行）

[3] 国家自然科技资源平台 微生物菌种资源描述规范汇编（试行）